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检测前 水样预处置有关
1.含有余氯水样在进行大肠菌群指标检测前是否必要进行预处置？
答：必要。
余氯蕴含游离性余氯和化合性余氯。游离性余氯（HClO、ClO?、Cl?）与化合性余氯（NH?Cl、NHCl?）能急剧粉碎细菌的细胞壁、细胞膜，氧化细菌内部的酶和遗传物质，导致细菌殒命。若是对含余氯水样不进行预处置，水样中的大肠菌群可能部门被杀灭、导致检测了局偏低。
表1 余氯预处置有关尺度
针对含余氯水样，可选用2121非凡无菌取水袋或无菌取样瓶，两类产品均依照 GB/T 5750.2-2023《生涯饮用水尺度检验步骤 第 2 部门：水样的采集与保留》的有关要求增长硫代硫酸钠，可有效去除水样中的余氯。若使用2121非凡未增长硫代硫酸钠的无菌取水袋、无菌取样瓶，建议对含余氯水样先行预处置。
2.沉金属离子含量高的水样为什么要进行预处置？
沉金属离子会扭转酶底物试剂系统的离子强杜纂pH值，直接抑造指标微生物体内酶的活性，导致其无法与酶底物充分反映。部门沉金属离子与显色剂或反映产品结合，产生沉淀影响判读，造成检测了局偏低。
凭据HJ 1001-2018《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》与HJ 347.2-2018《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》划定：若是采集的是沉金属离子含量高的水样，应在每100mL水样中增长0.036g乙二胺四乙酸二钠。
幼贴士
环境水样中北方地域干旱降雨少，且宽泛散布石灰岩、白云岩、富钙黄土等，矿物质易被水溶化，导致水样中沉金属离子含量偏高。南方地域湿润多雨，且重要散布火成岩（花岗岩等）、变质岩等，矿物质不易溶化，水体沉金属离子含量偏低。
地下水因漫长渗入过程，可能充分溶化地层（如石灰岩、石膏）中的金属离子，地下水的沉金属含量普遍高于地表水。
2121非凡酶底物法大肠菌群检测试剂复配多种成分，可能缓冲沉金属离子的冲击，各组分与沉金属离子不会产生理化反映。经质控菌株与水样检考试证，使用2121非凡的耗材与酶底物法大肠菌群检测试剂，不需对沉金属离子含量高的水样额表进行预处置。
检测中 尝试过程与造就有关
1.酶底物法大肠菌群检测出现淡色孔的原因、处置步骤与检测了局判读？
答：酶底物法大肠菌群检测出现淡色孔的原因有：
1）水体中的部门大肠菌群自身成长慢、产酶少。
2）环境压力造成部门大肠菌群菌体处于危险状态。
凭据GB/T 5750.12-2023 《生涯饮用水尺度检验步骤 第12部门：微生物指标》总大肠菌群检测酶底物律例定：若是了局为可疑阳性，可耽搁造就功夫到28h进行了局判读。
造就功夫幼于 24h出现的阳性了局视作有效，造就功夫高于28h的阴性了局也视为有效。
24-28h内出现的了局变动以 28h最终了局为有效了局，28h后出现的了局变动均视为无效。
2. 酶底物法大肠菌群检测出现可疑阳性孔、为什么能够耽搁造就功夫至28h观察了局？
答：耽搁造就功夫至28h，是对24h可疑阳性了局的补充确认。若是24h已出现明确阳性，则不需耽搁造就。只有存在难以辨认的可疑阳性了局，需耽搁造就功夫至28h。
对大肠菌群：28h是一个经过验证的、能充分推进绝大无数受到环境压力而菌体危险的大肠菌群复原的窗口期。
对于非大肠菌群：28h是一个安全天堑，能够确保抑菌成分的有效性，最大限度地预防非大肠菌群的成长，从而保障步骤的高特异性。
3. 为什么粪大肠菌群检测时，定量盘中会出现渐变黄色？
答：由于造就箱加热方式、定量盘摆放与堆叠方式造成定量盘受热不均，影响粪大肠菌群的成长。
定量盘摆放与堆叠方式造成箱体内热传递更慢，热散布更不均匀。粪大肠菌群作为温度敏感型细菌，在温度低的一侧成长产酶变色，在温度高的一侧（如超出了44.5 ± 0.5℃的上限），成长被抑造，出现如下图所示的渐变色。
当定量盘出现渐变黄色，应马上凭据GB/T 10592-2023 《凹凸温试验箱技术前提》与GB/T 28851-2012 《生化造就箱技术前提》有关尺度进行造就箱温度验证。凭据验证了局，选取JJF 1101-2019 《环境试验设备温度、湿度参数校准规范》与《造就箱使用说明书》进行温度调节。保障造就温度切合检测前提。
建议粪大肠菌群检测时，使用隔水式造就箱，定期进行温度验证，将定量盘置于造就箱中央，且定量盘堆叠不超过5个，每叠定量盘之间至少距离5cm。
检测后 拔除物处置有关
1. 酶底物法微生物检测造就后的定量盘若何处置？
答：造就后的定量盘经121℃、高压蒸汽灭菌20min后，作为通常拔除物处置。
1）造就后的定量盘置于专用的拔除物容器内，集中存放在指定地址。
2）造就后的定量盘每20个放入双层生物安全灭菌袋中，袋口打结。
3）放入灭菌锅经121℃、高压蒸汽灭菌20min处置后，作为通常拔除物处置。
集中存放→双层生物安全灭菌袋→121°C、高压蒸汽灭菌20min
凭据GB 19489-2008 《尝试室生物安全通用要求》 ；SN/T 4835-2017 《尝试室生物拔除物治理要求》 ；HJ 1001-2018 《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》有关划定。